2019, Vol. 51
2. 上海市崇明区气象局, 上海 202150;
3. 长三角环境气象预报预警中心, 上海 200030
氧化亚氮(N2O)是重要的温室气体之一，也是破坏臭氧层的主要物质之一。据估计，自工业化以来，人为活动已经导致大气N2O浓度增加了20%[1]。从全球来看，土壤是N2O排放的最大来源(估计为6.8 Tg/a，以N2O-N量计，下同)，占排放到大气中的N2O总量的65%左右，其中4.2 Tg/a直接或间接来自于氮肥，2.1 Tg/a来自于粪肥以及0.5 Tg/a来自于生物质的燃烧。因此，农田土壤被认为是大气N2O的最大人为排放源[2]。针对农田N2O排放量，已有研究显示出巨大的差异，从0.7 mg/(m2·d)到51.8 mg/(m2·d)[3-6]；并且，不同农田类型之间也存在较大差异，其中菜田N2O排放量远高于邻近的水稻、小麦、玉米等大田作物[7-10]。同时，较多研究发现，农田N2O排放不存在明显的季节变化模式，多以脉冲的形式释放[10-12]。Parkin和Kaspar[13]在两年玉米田N2O排放的研究中发现，脉冲事件占累计年排放量的比例高达49%。
微生物的硝化和反硝化作用是调节和控制土壤N2O排放的关键过程，而这一过程会受到自然环境条件和农业管理措施直接或间接的影响。许多文献[14-16]综述了影响N2O排放的因素，普遍认为农田N2O排放主要与农业管理措施(氮肥施用量、水分管理、作物种类、肥料种类)和土壤条件(有机碳含量、pH、质地)等有关，其中氮肥施用是导致N2O排放差异的主要因素。Hoben等[17]发现，玉米-大豆轮作系统施氮量的N2O响应呈非线性指数增长。而在全球范围内，Stehfest和Bouwman[16]发现N2O排放量和氮肥施用量之间存在线性关系。研究表明，氮素的转化率直接影响硝化反硝化作用或两个过程的耦合[18]，从而影响N2O的排放。除了肥料施用，灌溉或降雨对农田N2O排放也会产生重要影响[12, 19]。这可能是由于水分增加后，氮肥的水解速率以及硝化速率较快，同时高土壤孔隙水(WFPS)加速了反硝化过程[20]。许多研究都观测到，干旱土壤润湿后产生的代谢活动会刺激N2O排放，降雨会导致N2O脉冲峰出现[21-23]。因此降雨对农田(尤其对于降水为主要水分输入来源的农田系统)N2O排放的影响不容忽视。
由于农田N2O排放多以脉冲形式释放，因此需要使用连续的、长期的、高频率和高精度的通量监测方法来捕捉短时间的偶发N2O脉冲峰[24]。然而目前许多研究基于静态箱-气相色谱法(简称“箱式法”)开展，这种方法需要较高的人工投入，并且观测频率较低可能导致季节或年总排放量估算存在偏差[25]；同时由于农业土壤的空间变异性大，使用箱式法观测可能造成通量的低估或高估，例如有研究发现，在中国山西棉花田，箱式法比涡度法低估了17% ~ 20%的N2O排放[25]。涡度协方差技术是基于微气象学的测量温室气体通量的技术，可以在不干扰环境条件的情况下观测生态系统尺度上的平均通量[26-28]。近年来随着快速响应探测器如可调谐二极管激光器(TDL)和量子级联激光器(QCL)等的发展，基于涡度协方差法的N2O通量观测逐渐得到开展[15]，相关研究在国际上日益增加，但目前还未见国内文献报道。
到目前为止，大多数关于N2O排放的研究主要关注单一因素的影响，特别是施肥的影响[29-33]，在很大程度上忽视了其他农业措施包括水分管理等的综合效应。然而，在实践中农民更倾向于采取综合管理的措施来提高生产力，因此更详细的综合研究是十分必要的。小麦是世界主要粮食作物之一，在我国的种植面积和产量仅次于水稻。虽然目前有研究报道了施肥和降雨(或灌溉)配合发生会强烈促进N2O排放[28, 34]，但对于降雨和施肥事件的发生顺序可能带来的不同交互影响以及如何量化“水肥”组合对小麦田N2O排放的贡献却未见文献探讨。在基于涡度协方差技术的小麦田N2O通量观测基础上，本文探讨了小麦田生长季内N2O的排放动态，研究了不同时间尺度上小麦田N2O排放对降雨和施肥的响应，同时定量分析了降雨和施肥相关因子对小麦田N2O排放的贡献率，探讨了N2O通量对于降雨和施肥事件发生的先后顺序(“水肥”组合)是否有不同的响应，从而为实施低碳农业提供一些科学指导。
1 研究区概况与研究方法 1.1 研究区概况研究区位于上海崇明岛，崇明岛地处长江口，属于典型的北亚热带季风气候区。降雨充沛，四季分明，年平均气温15.8℃，年日照时数1 973.9 h，年平均降雨量1 128.9 mm，主要集中在4—9月。原位观测实验站位于崇明岛中部(121°29′38″ E，31°39′59″ N)，耕层土壤为粉壤土，偏碱性。研究区多年稻麦两熟轮作，每年5—10月种植水稻，而从每年10月至次年5月种植小麦。
在崇明岛，小麦主要采用撒播方式种植。本研究供试小麦为扬麦11号，于2014年10月22日播种，次年5月20日收获，成熟小麦平均株高约1 m。由于崇明岛雨水充足，因此小麦生长季内无灌溉管理。该观测塔周边农田由当地农场实行统一管理，其中，在2014年10月20日施加复合肥(N，27 kg/hm2)做基肥。不同生长阶段肥料施加信息见表 1。
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表 1 肥料施加信息表 Table 1 Information of fertilizer application |
本研究采用涡度协方差方法(eddy covariance method)进行观测。该通量塔位于崇明岛中部，考虑到周边农田较为均一，且存在防护林(防护林高度在12 m左右)，将通量观测高度设置在20 m。该通量观测点配置了CR3000数据采集器(美国Campbell公司)，以三维超声风速仪(CSAT3，美国Campbell公司)观测三维风速，以快速响应N2O气体分析仪(913-0014，美国Los Gatos Research公司)观测N2O浓度。N2O气体分析仪被安置在一个环境稳定的工作室，距离三维超声风速仪大约20 m。参考Eugster等[35]的实验，该观测系统使用长21.6 m，内径为10 mm的聚四氟乙烯管，连接气体分析仪和位于试验地中央的三维风速仪。空气通过真空泵进入气体分析仪，首先经过干燥剂过滤多余的水蒸气。样气的管道流速为21 L/min。该分析仪可以提供N2O气体含量的10 Hz连续数据，并实时进行水汽校正[36]。Campbell公司的CR3000数据采集器用于记录所有10 Hz数据。观测阶段为2014年10月至2015年5月，包含整个小麦生长季。环境因子观测包括降雨、空气温度、土壤温度等。
本研究采用Eddy Pro软件(version 6.1.0)进行通量计算和数据质量控制。主要过程包括：去除了超出仪器测量范围和超过4倍标准差的异常值[37]；运用坐标轴二次旋转法使垂直风速均值为零[38]；超声虚温校准(SND correction)[39]；频率损失校准；WPL校准[40]等。本研究所使用的闭路涡度协方差系统，抽气系统中安装质量流量控制器，延迟时间由N2O浓度和垂直风速的最大协方差出现的时间来决定[28]。参考Foken等[41]的方法进行稳态测试(stationarity test)，采用“0-1-2”系统对通量数据进行质量标签，其中“2”表示由于质量差而应从所得数据集中丢弃的通量。主要通过以下方式对N2O通量数据进行数据质量控制：①异常数据的剔除。删除仪器处于非正常工作状态的瞬时值，如气压不稳定、以及根据诊断文件剔除闭路系统进行标定时的观测数据等；②删除稳态测试质量标签为2的数据[41]；③去除夜间摩擦风速 < 0.2 m/s时的数据[28]。最终2014年10月21日至2015年5月20日的数据保存率为51.2%。参考Molodovskaya等[24]的方法，本研究将质量控制后日保存率≥25%(≥12个半小时数据点)的半小时数据的平均值作为N2O日平均通量(μg/(m2·h))，而N2O日排放量(μg/(m2·d))为日平均通量乘以24。月尺度的N2O通量通过积分计算，其中2014年10月因为监测日期较少，因此未列入月尺度的分析。
1.3 统计分析本文采用SPSS 22.0和R软件对数据进行处理和分析。为探究降雨对N2O通量的影响，采用线性回归方法分析月尺度以及小时尺度上土壤N2O通量与降雨量的相关性；以单因素方差分析检验施肥前后日平均通量的差异以及降雨前、雨中、雨后日通量变化的差异；以增强回归树模型(boosted regression trees，BRT)分析施肥和降雨的交互影响。
增强回归树(BRT)是一种用于非线性关系分析的机器学习方法，它结合了Regression trees和Boosting两种算法的优势。在该回归模型中，响应变量为土壤N2O排放量，解释变量包括降雨量、距上次降雨日差、施肥量、距上次施肥日差以及降雨施肥的日差。BRT可以计算在其他自变量取均值或不变的情况下，某一自变量与因变量的相互关系，从而得出自变量对因变量的影响大小以及各个解释因子的相对重要性排序。BRT提高了计算结果的稳定性和精度，同时可以适用于不同的数据格式。本研究使用R软件来运行BRT(“gbm”软件包)，模型的参数设置参考Ma等[42]。
为判断土壤N2O的脉冲峰并计算其对日排放的贡献，本文采用箱线图分析小时通量并设置脉冲峰的阈值。箱线图的优点在于它将统计数据的大小与中值而不是平均值相联系。因此即使当通量数据不呈正态分布时也可以使用[43]。箱线图最重要的是对相关统计点的计算，例如下四分位数Q1、上四分位数Q3以及中位数Q2。上边缘(UF，upper fence)和下边缘(LF，lower fence)通常设置在四分位距(IQR，IQR= Q3–Q1)的固定距离处(n倍)，计算公式为：
| $ {\rm{UF = Q3 + }}n\left( {{\rm{Q3-Q1}}} \right) $ | (1) |
| $ {\rm{LF = Q1-}}n\left( {{\rm{Q3-Q1}}} \right) $ | (2) |
参照Molodovskaya等[24]，本研究对脉冲峰的定义：(n=0.5)UF作为小麦田N2O脉冲检测的最低边界，阈值以上的所有N2O通量定义为脉冲峰。本文对降雨前、降雨中及降雨后的日平均通量的定义为：在日尺度上，若某一日发生降雨，且前后两天无降雨，则这3 d的通量分别代表降雨前、降雨中、降雨后的通量；若连续数日发生降雨，取平均值代表降雨中的日平均通量，则降雨前后取相同天数日通量的平均值分别为降雨前及降雨后的平均日通量，最后计算所有降雨前、雨中以及雨后的日通量的平均值，即分别为相应的N2O平均日排放量。根据小时降雨数据，本文对“降雨中24 h”通量的定义：与降雨前、降雨中及降雨后的定义相对应，若降雨集中在一天，则当日的N2O通量即为降雨中24 h的排放量；若连续若干天都有降雨，则将其对应时刻的通量取平均值即为降雨中的24 h的通量变化情况，同时相应的以相同天数求得降雨前和降雨后的24 h通量。
2 结果与分析 2.1 小麦田N2O排放动态及环境因子变化本研究的观测期为2014年10月至2015年5月，包含了完整的小麦生长季。经过数据的质量控制，观测阶段总共收集5 208个半小时数据，数据保存率为51.2%。观测阶段共212 d，其中数据保存率≥25%的天数为203 d，占全部观测时间的95.8%。
在研究阶段内，土壤和空气温度都呈现先下降再上升的趋势，在12月份土壤和空气平均温度均达到最低，分别为4.8℃和4.2℃，在5月14日空气和土壤温度达到最高，均为23.6℃，而1月初最低温度分别为-0.1℃和1.6℃；同时12月份的降雨量最少，为7.5 mm；降雨在3、4月份较为集中，分别达到103.5 mm和98 mm(图 1)。整个研究阶段内累计降雨475.2 mm。根据小麦生育期特点，同时结合不同时期温度和降雨的分布情况，将本研究划分为4个阶段(图 1、表 2)。第1阶段主要对应小麦的出苗期，主要特点是降雨量较少，但平均温度较高；第2阶段主要对应小麦的幼苗、越冬期，该阶段温度低且降雨最少；第3阶段包括小麦的返青、拔节期，这个阶段有最大的施氮量和降雨量；第4阶段从2015年4月5日至5月20日小麦收获，该阶段降雨量为146.9 mm，但没有进行施肥。
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(绿色箭头表示施氮，其长度代表施氮量；灰色线表示误差线，即每天收集数据的标准差(≥12个半小时数据点)； 灰色虚线表示将研究期划分为4个阶段) 图 1 N2O日平均通量及环境因子(降雨量、空气温度、土壤温度、施氮量)的变化 Fig. 1 Daily average N2O flux with precipitation, air temperature, soil temperature and N fertilizer |
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表 2 4个观测阶段对应的小麦生育期及降雨量、施氮量和N2O通量 Table 2 Corresponding wheat growth periods, precipitation, fertilization rates and N2O fluxes during the four measurement phases |
具有不同降雨和施肥组合情况的4个阶段对应的N2O平均日排放量如表 2所示。其中研究阶段内N2O平均日排放量为666.5 μg/(m2·d) ± 669.4 μg/(m2·d)。降雨量、施氮量最高的第3阶段，N2O平均日排放量最高。第2阶段与第1阶段施氮量相当，平均日排放量比第1阶段少48.5%，这可能是由于基肥和不同降雨量引起。第4阶段虽然没有施氮，N2O平均日排放量比第2阶段高89.0%，可能是受到降雨的刺激。整个小麦生长季内，小麦田生态系统以N2O形式的氮损失量约为1 355.8 g/hm2，其中脉冲占总排放量的比例高达38.5%。在观测阶段共记录了26次脉冲事件(表 3)，其中由“水肥”组合引发的脉冲次数占42.3%，而由单独的降雨或施肥事件引发的脉冲分别为9次和3次，排放量共占小麦田N2O总排放量的18.2%，与“水肥”组合触发的脉冲占比相当。因此，降雨事件造成的脉冲对总排放量的贡献高达29.4%，而施肥带来的贡献达19.2%。
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表 3 生长季内降雨、施肥、“水肥”组合等引发的脉冲及其对N2O总排放量的贡献 Table 3 Pulses caused by precipitation, fertilization and combination of 'Precipitation and Fertilizer' in the whole season and their percentages of total accumulated N2O Emissions |
从4个阶段N2O的日变化来看(图 2)，小麦田N2O排放没有明显的昼夜变化模式。通常排放峰出现在白天，除了图 2中的第3阶段可能因为频繁降雨的影响，其他3个阶段中均表现为白天的排放量高于夜间。尽管季节尺度上，土壤温度与小麦田N2O通量的季节动态相关性不显著，但在图 2第1阶段中土壤温度与N2O排放量的日变化(小时尺度)呈线性相关，相关系数(R2 = 0.76，P < 0.05)。然而其他3个阶段中并未观测到温度与N2O通量的明显相关性，在降雨量最多的第3阶段，夜间通量出现排放峰可能是受到夜间降水的影响。
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(A、B、C、D分别代表研究的第1 ~ 4阶段) 图 2 四个阶段N2O日平均通量及土壤温度的变化 Fig. 2 Diurnal variation of N2O flux and the soil temperature for the four sub-periods defined in Table 2 |
总的来说，N2O排放没有明显的昼夜和季节变化，主要以脉冲的形式释放。相比于温度，降雨和施肥是引发通量脉冲的主要因子。通常，在施肥后N2O排放呈现先增加再减少的趋势，当施肥后发生降雨事件，可能激发N2O的脉冲峰。单独的降雨事件也会引发脉冲。
2.2 降雨对N2O通量的影响由于在小麦生长季内无人工灌溉，降雨是小麦田最主要的水分来源，其能改变土壤含水量和通气状况，从而直接影响微生物生命活动的微环境。小麦田N2O月通量与月降雨量呈显著正相关关系(R2=0.56, P < 0.05)(图 3)。这可能是由于降雨量高导致土壤含水量高，土壤内部通气性差，从而提供了N2O产生所需的厌氧条件。
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图 3 小麦田N2O月通量与降雨量的关系 Fig. 3 Relationship between monthly N2O flux from wheat soils and precipitation |
图 4显示了降雨前、降雨中及降雨后的N2O日平均通量的变化。显然，土壤N2O在降雨事件发生的当天相比前一天排放量显著增加，降雨中的平均日排放量为1 049.3 μg/(m2·d)，比降雨前增加了65.6%。而降雨后一天的平均日通量为860.9 μg/(m2·d)，相比降雨前增加35.9%，相比降雨中日平均排放量减少18.0%，但差异均不显著。
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(图中不同小写字母表示各时期差异在P < 0.05水平显著) 图 4 N2O日排放通量 Fig. 4 Daily N2O flux |
为了更好地探讨降雨量对小麦田N2O通量的影响，本文按照前文所分的4个阶段，分别将降雨前、降雨中、降雨后的24 h N2O通量变化显示在图 5中。可见，降雨前的小麦田N2O通量在4个阶段中并没有表现出明显的昼夜变化模式；除了第2阶段中降雨当日通量没有明显的波动，其他3个阶段均有明显的排放峰，其中第1、3、4阶段的脉冲分别占一天释放量的24.8%、28.9%和54.1%；而受降雨的影响，4个阶段中雨后一天的N2O排放相比降雨前一天显著增加(P < 0.05)，然而雨后24 h中，仅在第1和第2阶段时出现通量脉冲峰，分别占一天释放量的30.5%和48.8%。这可能是由于第1和第2阶段时降雨量较少，土壤相对干燥，当发生降雨事件后极大提高了底物可利用性从而促进微生物生命活动产生代谢产物N2O。由此可见，降雨会促进土壤N2O的脉冲峰，并且由于降雨对土壤湿度、通气性等性质的改变，在雨后24 h内降雨对土壤N2O释放仍有促进作用。
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(A、B、C、D分别代表研究的第1 ~ 4阶段；P0表示降雨当日N2O通量与降雨量的关系；P1表示降雨后一日N2O通量与降雨量的关系) 图 5 表 2中定义的4个阶段降雨前后N2O通量的日变化 Fig. 5 Diurnal variation of N2O flux for the four sub-periods defined in Table 2 |
不同阶段因为温度和降雨量不同，土壤N2O通量对降雨量有不同的响应。在第1和第2阶段中(图 5A和图 5B)，随着降雨量的增加降雨当日的土壤N2O通量呈现递减趋势，相关关系分别可以表示为：Y= –37.46X+154.02(R2=0.42, P < 0.001)、Y= –17.65X+43.77 (R2=0.37, P < 0.001)。而第3、4四阶段(图 5C和图 5D)，土壤N2O的排放随着降雨量的增加而增加，但趋势并不显著。对于雨后24 h内的通量，4个阶段均表现出随降雨量的增加而增加的趋势。在第1和第2阶段中，当降雨量 < 1.5 mm和降雨量 < 1 mm时，降雨量和N2O通量呈现线性相关关系，决定系数分别为0.40 (P < 0.05)和0.40(P < 0.05)。在第3个阶段中，土壤N2O通量与降雨量呈现线性相关，决定系数为0.34 (P < 0.05)。而在第4个阶段中，当降雨量 < 4 mm时，土壤N2O通量与前一日降雨量呈现一定的线性相关性。
2.3 施肥对N2O通量的影响由表 4施肥前后日平均通量的对比可以看出，施肥后1 ~ 4 d中，小麦田N2O日平均通量相比施肥前均有增加但并不显著(P > 0.05)；而施肥后5、6 d相比施肥前呈现显著差异，日平均排放量分别为1 444.6 μg/(m2·d)± 749.2 μg/(m2·d)、1 413.8 μg/(m2·d)±711.7 μg/(m2·d)，相应地相比施肥前的日均排放量增加35.2%(P < 0.05)和41.3%(P < 0.05)。
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表 4 施肥前后N2O日平均通量(μg/(m2·d)) Table 4 Daily N2O flux before and after fertilization |
本文采用了增强回归树(BRT)法分析施肥和降雨的交互影响，发现5个降雨和施肥相关因子与N2O通量的关系以及各个解释变量的贡献率排序为(图 6A)：距上次降雨日差 > 降雨施肥日差 > 距上次施氮日差 > 降雨量 > 施氮量。由此可见，降雨和施肥事件对土壤N2O排放有不同程度的影响，同时降雨和施肥的不同组合形式对小麦田N2O通量的影响不容忽视。
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图 6 不同的解释因子(降雨量、距上次降雨日差、施肥量、距上次施肥日差、降雨施肥日差)与小麦田N2O排放的关系及其重要程度排序 Fig. 6 Relationship between different explanatory factors with N2O emission from wheat soils and the order of their importance |
从小麦的整个生长季来看，降雨和施肥事件对N2O排放的影响都呈现随日差增大而减小直至平稳的趋势(图 6B和6D)，且这两个解释因子的贡献率达51.2%。在降雨当日以及降雨后3 d内(图 6B)，小麦田N2O日排放量维持在较高的水平，而雨后第5天后释放量明显下降。相比降雨，在施肥后6 d时间内，N2O排放通量呈现增加的趋势(图 6D)，这与前文2.3的结论一致，之后施肥事件对N2O通量的影响随着日差增大而减弱，N2O排放量降低趋于平稳。
降雨量也是影响小麦田N2O排放的重要因子之一，对通量排放的贡献率约为21%。随着降雨量增加(图 6E)，N2O通量整体呈现波动式的上升，少量降雨(< 4 mm)就会刺激N2O日排放量，这种增加趋势明显高于日降雨量较高(> 10 mm)的时期。而施氮量对N2O排放的贡献率最小可能是由于本研究中仅有3个施氮量水平所造成的数据的限制(图 6F)。
综合考虑降雨和施肥的交互影响，两个事件发生的先后顺序通过相差的天数来描述(图 6C)，横坐标为负值表示降雨在前施肥在后，可能是受到降雨的刺激，这种情况下通量的变化呈现无规律波动；而当先施肥后降雨时(横坐标为正值)，随着日差的增加，土壤N2O通量呈现先增加后降低直至趋于平稳的波动趋势。即在日差8 d的阶段内，施肥以后降雨发生的越晚，小麦田N2O释放量越大；在日差超过8 d后，随着施肥和降雨相差的时间越长，观测到的N2O通量越低。降雨施肥日差这一因子的贡献率仅次于距上一次降雨的日差。
3 讨论 3.1 小麦田N2O排放特征本文研究了2014—2015年上海市崇明岛冬小麦完整生长季N2O排放情况，研究期内N2O日平均通量为27.6 μg/(m2·h) ± 28.2 μg/(m2·h)。这低于Cui等[12]报道的位于中国山东的冬小麦实验田平均通量(49 μg/(m2·h))，而高于Shi等[34]报道的小麦田的平均通量(7.5 μg/(m2·h))。这可能是受到施肥种类以及施肥量的影响。本研究小麦田的N2O通量远低于邻近地区的菜田[10]以及玉米田[28]。有研究显示N2O的排放主要取决于以下因子：降雨、施肥、耕作、作物种类以及土壤因子，同时不同观测仪器也显示出明显差异[26, 28]。大部分观测发现农田N2O的排放没有明显的季节变化[24, 28, 44]，主要以脉冲的形式释放，这与本研究结果一致。本研究中降雨触发的脉冲占N2O总排放量的比例高达29.4%，施肥的贡献达19.2%，其中由“水肥”组合带来的排放占比为15.2%，同时“水肥”组合引发的脉冲次数占所有脉冲事件的42.3%。有报道称在荷兰泥炭地奶牛场连续3个月的测量中，降雨触发的脉冲占总排放量的40%[45]。Scanlon和Kiely[46]在连续8个月的涡度协方差方法的通量监测试验中，记录了3个主要的脉冲峰，这3个事件的发生时间总和共16 d(占总监测时间的6.6%)，但是其对累计通量的贡献高达51%，高于本研究脉冲的贡献38.5%。一些研究报道N2O通量随着温度的升高而增加，通常遵循Arrhenius函数[47-48]。然而在本研究中温度和N2O排放不存在非线性关系。
3.2 降雨与小麦田N2O排放土壤水分是影响温室气体产生与排放的重要因素之一，它不仅是土壤中营养物质的运输载体，而且可以通过改变土壤通气性等因素影响土壤生物地球化学过程[44]。本研究发现在月尺度上，降雨量与N2O通量通量呈线性相关；在日尺度上，降雨当日小麦田N2O通量的增幅最大，而随着时间增加，降雨的促进作用快速减弱；小时尺度上的分析发现，降雨事件发生后(包括降雨当日以及雨后1 d)，在4个阶段都观察到了N2O脉冲峰。由此可见，降雨对N2O排放有明显的促进作用，且土壤释放的N2O对降雨事件的响应比较迅速(主要集中在雨后的几小时内)，同时降雨的影响能持续1 ~ 2 d。许多研究都发现，降雨后N2O排放量增加。徐文彬等[49]针对贵州省旱田的研究表明，降雨量 > 5 mm的降雨事件与土壤出现N2O脉冲峰间的耦合关系达100%，因此降雨事件与N2O排放峰间存在明显的驱动-响应关系，这可以解释本研究中距上次降雨日差这一解释因子对小麦田N2O排放贡献率最大的原因。Vidon等[50]用箱式法在模拟降雨的试验中观测到，雨后5 ~ 24 h内土壤N2O排放明显增加，但随着土壤湿度恢复到降雨前的水平，土壤N2O排放降低甚至变为负值。由于小麦田生长季中无灌溉，降雨直接改变小麦田土壤的水分状况，从而直接或间接地影响微生物的硝化反硝化过程。
在小麦生长季的不同阶段，N2O脉冲峰对降雨有不同的响应，同时脉冲峰的大小和持续的时间还受到温度、土壤养分供应等其他因子的交互影响。本研究在降雨当日以及降雨后1 d都观测到了脉冲峰。土壤的干湿交替为硝化反硝化作用的交替进行创造了环境，许多文献也报道了干旱土壤润湿后触发N2O脉冲的现象[51-53]。而本研究在第3、第4阶段降雨后1 d N2O通量变化中没有观测到脉冲峰，这可能和底物的消耗有关。类似的现象在土壤CO2通量观测中被报道，连续的干湿交替常常表现出减少CO2排放的脉冲幅度[54]。欧阳扬和李叙勇[55]等也报道，随着干湿交替频率降低，再湿润阶段的通量释放速率增大，多次的干湿交替后，最后一次再润湿阶段N2O通量的激发强度明显减弱。降雨量大、频率高有利于土壤严格厌氧条件的迅速形成，这可能是第3、4阶段未观测到明显脉冲的原因。降雨当日的N2O排放(图 4)在第1、3、4阶段均出现明显的脉冲峰，峰值占一天释放量的比例高达54.1%(第4阶段)。Wu等[44]的研究发现，冻融事件带来的脉冲甚至占据全年排放量的73.3%。Molodovskaya等[24]观测了2006—2009年的苜蓿-玉米轮作田N2O排放，发现N2O背景通量普遍低于6.5 mg/(m2·h)，但降雨、冻融等触发的脉冲达39.7 mg/(m2·h)，对N2O总净排放量贡献了71% ~ 102%。由此可见，脉冲是N2O主要的排放形式，对通量日排放甚至年总排放量的贡献不容忽视。虽然本研究第3阶段时降雨量和施肥量最大，但最高的脉冲峰出现在第4阶段，达553.49 kg/(m2·h)，这可能与温度有关。
3.3 施肥与小麦田N2O排放大量研究表明，施用氮肥增加土壤氮素含量，为微生物的硝化、反硝化过程提供丰富的NO– 3、NH4+，从而明显促进土壤N2O排放[29, 56]。Zhang等[31]在对菜地基肥或追肥后一周内观察到强烈的N2O排放峰，而在本研究中施肥的影响也存在时滞，氮肥的添加对小麦田N2O排放的促进作用在施肥后一周左右表现出来，且距上次施肥日差是影响小麦田N2O排放的重要因子之一。许多研究者在农田中的研究发现，施肥会增加硝化和反硝化作用速率，从而促进土壤N2O排放；施氮的影响可以持续几天至几周不等，当反应底物逐渐消耗，N2O排放恢复[28, 57]。关于施肥量与N2O排放的关系，一些文献综述了近年来在不同地区的野外研究，得出较为一致的结论[15, 58]，即随着施氮量的增加，土壤N2O排放呈线性增加的趋势。本研究中，由于施肥次数有限且连续两次施肥活动间隔短，为避免多次施肥的叠加影响，本文未能对施肥的持续影响时间做进一步分析。同时可能由于数据量的限制，本研究中施氮量这一N2O通量变化的解释因子的贡献率最低(图 6F)。
本研究在小麦的不同生长阶段施用尿素或者复混肥。作为硝化和反硝化作用的底物，可利用性无机氮素是刺激土壤N2O排放的关键因素。无机氮的添加对N2O通量的影响已经被广泛的研究和综述[2, 29, 59]。尿素为硝化作用提供底物，并且硝化产物NO– 3又可以作为反硝化作用的底物。因此，小麦田N2O可以通过硝化过程或随后的反硝化过程从尿素中产生。本研究施用的复混肥中含有一定量的有机肥。考虑到有机氮肥的成分组成，向土壤中添加有机氮肥可以通过提供必要的碳底物来驱动微生物硝化和反硝化过程，从而增加N2O的排放[60]。事实上，关于施用无机氮肥或有机氮肥对N2O排放的影响目前还没有统一的结论。目前一篇综述分析发现两种土壤管理方法下的N2O排放没有显著的差异[57]。但针对美国中西部玉米田的分析发现，施用粪肥比施用有机氮肥的土壤释放出更多的N2O[61]。然而，这些作者也指出，一些研究中有机氮肥的施用速率比无机氮肥高，可能因此导致施用有机肥的土壤中N2O释放量更大。
3.4 降雨和施肥的交互影响施用有机和无机氮肥主要影响如下因素：土壤有机碳、结构、水分、pH、氮素水平，而降雨会在短期内显著改变土壤孔隙水、pH、无机氮浓度等。N2O排放的微生物过程会受到多个因子的交互作用影响[62]，对于旱作农田，降雨和施肥活动是影响N2O排放的两个关键因素。氮素添加为土壤提供丰富的硝化反硝化作用底物，施肥后降雨事件的发生很有可能触发小麦田N2O排放的脉冲，并且二者的叠加影响激发更大的排放。类似的现象在玉米田的研究中被报道：该研究中，第1次施肥后没有降雨，土壤N2O通量未检测到明显变化，而第2次施肥后立刻发生3.02 mm的降水事件，明显的通量脉冲被观测到，且这种较高的排放在降雨后持续了3 ~ 4 d[28]。这与本研究的结论一致。氮素添加通过刺激微生物的硝化和反硝化过程，增加土壤中的无机氮含量，可能导致大量的NO3– 积累在土壤中。通过反硝化产生的N2O/N2比例随土壤NO3– 含量的增加而增加[63]，从而促进N2O排放。因此前期的施肥为微生物提供了丰富的底物，随后降水事件引发的水分条件的瞬时改变可能会持续短期(或几天)，在这个阶段中土壤厌氧条件占主导地位，反硝化速率显著增加从而促进N2O排放[64]。其他研究指出，也可能是降雨后土壤孔隙中充满水而排出高浓度气体，N2O排放量增大[65]，本研究可能发生了相同的机制。在本研究中，施肥事件对小麦田N2O释放的促进作用在施肥后第5天表现出来，而降雨事件对通量排放的影响通常是短时的(1 ~ 2 d)，但综合考虑施肥和降雨的组合，在施肥后1 ~ 8 d内降雨，对通量排放均有明显的促进作用，可见这两个因素对土壤N2O排放的叠加影响会增强降雨和施肥事件对农田N2O排放的贡献。这可能是降雨施肥日差这一解释因子的重要性仅次于距上次降雨日差的原因。而随着施肥和降雨事件的间隔越久，超过8 d后施肥和降雨的叠加影响减弱，这可能是由于底物的消耗。因此，施肥和降雨事件的日差作为一个影响农田N2O排放的因子不应该被忽视。
土壤系统中各个因子交互作用，控制着氮循环过程。土壤质地、冻融、降水事件和温度均显著影响N2O的排放，但这些因素很难轻易地通过人工管理来控制[30]。其他影响N2O排放并且可以通过田间管理控制的因子包括：土壤有机碳含量、硝酸盐及铵盐的含量、氮肥施用量及种类和施用方式、土壤氧气含量、微生物丰度和活性、土壤pH、土壤水分以及作物种类。氮肥的应用以及降雨事件会影响到上述许多因素[60]，各因子的交互作用影响N2O排放的相对变化(例如，土壤水分的变化会影响微生物活性，同时无机氮含量也会受到影响)[66-67]。土壤水分能够直接调节土壤微生物的氧气可利用性，是N2O排放的主要驱动力[15]。排水受限的土壤，即使土壤水分不完全饱和，也更容易排放较多N2O。例如，细纹理土壤通常含水量较大同时排放较多的N2O[57]，因此可以通过修复或改变土壤的结构，增加土壤通气性从而降低N2O排放。已有研究证明增加土壤团聚体的稳定性可以在细纹理土壤团聚体之间产生较大的土壤孔隙，从而增加土壤的氧气含量减少N2O排放[68-69]。相比施用无机肥，施用有机肥的土壤倾向于具有更大的团聚体稳定性[70]，因此有机肥一定程度上可以减少N2O排放，尤其对于细纹理土壤。但同时土壤孔隙中的氧气含量是由土壤水分以及微生物活性决定的，所以施加微生物呼吸较高的有机氮肥可能会降低土壤氧气含量并增加N2O排放量。这些物理和生物过程相互作用影响土壤水分和氮素含量。考虑到施肥和降雨对N2O排放的综合影响较为复杂且往往触发的脉冲较大，在许多野外研究中可能会被错失[28]，因此针对不同生态系统还需要进一步探索。
4 结论本研究使用涡度协方差方法观测了2014—2015年冬小麦N2O通量，发现小麦田N2O排放没有明显的季节变化模式，主要以脉冲的形式释放。相比于温度，降雨和施肥是引发小麦田N2O脉冲的主要因子。降雨触发的脉冲占N2O总排放量的比例高达29.4%，施肥的贡献比例达19.2%，其中由“水肥”组合带来的排放占比为15.2%，同时“水肥”组合引发的脉冲次数占所有脉冲事件的42.3%。施肥对小麦田N2O排放的促进作用在施肥后一周左右表现出来，虽然通量对施肥活动的响应存在时滞，但是距离上次施肥日差这一解释因子的贡献率为24.8%，是影响小麦田N2O排放的重要因子。降雨对小麦田N2O排放有明显的促进作用，且N2O排放对降雨事件的响应比较迅速(主要集中在雨后的几小时内)，同时降雨的影响能持续1 ~ 2 d。对于小麦田来说，降雨触发的N2O脉冲对日通量排放的贡献高达54.1%。因此，距离上一次降雨日差这一因子的贡献率最大。综合考虑施肥和降雨的交互影响，在施肥后1 ~ 8 d内发生的降水事件，对于小麦田N2O的释放都有明显的促进作用，因此施肥降雨日差这一解释因子的重要程度不容忽视。对于小麦田等旱田来说，降雨是影响大而又无法人为控制的因素。因此为减少N2O排放同时保证肥料施用的效果，更重要的途径在于控制施肥的时机和种类等。雨后施用尿素更容易促进水解，从而促进N2O产生，因此可以考虑降雨前有机和无机肥的综合施用，保障农作物产量的同时降低农田N2O的排放。
致谢: 感谢复旦大学肖向明教授、李香萍老师等的指导，感谢复旦大学王莹冰、辛凤飞的帮助。
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